Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.26 – молекулярна генетика. – Інститут молекулярної біології і генетики НАН України, Київ, 2002.
Дисертація містить теоретичний та експериментальний матеріал із використання ПЛР-аналізу для дослідження молекулярно-генетичного поліморфізму ячменю (Hordeum vulgare L.) з метою картування його геному, а також застосування системи ПЛР-маркерів для характеристики генотипів ячменю.
За допомогою ПЛР-маркерів, отриманих в результаті аналізу, проведено картування хромосом ячменю з використанням модельної популяції дигаплоїдних ліній ярого ячменю OWB. На картах хромосом досліджених ліній локалізовано 51 маркер, в тому числі 36 ПЛР – маркерів (22 RAPD -, 11 ІSSR-, 3 SSR-маркери ) та 15 морфологічних. Сумарний розмір, що охоплюють маркери дорівнює 926,4 сМ. Це відповідає приблизно 74 % від загального розміру геному ячменю. Середня відстань між маркерами - 18, 6 сМ, мінімальна – 4,3 сМ.
Відібрано систему мікросателітних маркерів для характеристики сортів ячменю. Проаналізовано та детально охарактеризовано алельний склад 20 мікросателітних локусів у сортів ярого ячменю південно-української селекції. Використана система мікросателітних маркерів дала змогу диференціювати генотипи в межах дослідженої вибірки. На основі отриманих мікросателітних маркерів проведено ідентифікацію досліджених сортів, складено генотипові формули. Оцінено можливість застосування обраної системи мікросателітних маркерів з метою реєстрації генетичних ресурсів ячменю.
ПЛР-аналіз молекулярно-генетичного поліморфізму геному ячменю дозволив зробити такі висновки:
1. Внутрішньовидова варіабельность ячменю (Hordeum vulgare L.) характеризується показником дивергенції мікросателітних локусів від 0,050 до 0,557, що властиво більшості видів культурних злаків. Найполіморфнішою є фракція мікросателітів, яка містить GA-повтори.
2. При картуванні геному, для визначення й ототожнення з хромосомами ПЛР-маркерів, показано перспективність використання аналізу генетично однорідних множинно маркованих дигаплоїдних ліній. Виявлено зв'язок між низкою поліморфних ПЛР-продуктів і морфологічними характеристиками.
3. Розроблено систему диференціації, ідентифікації та реєстрації генотипів ячменю на основі аналізу поліморфізму мікросателітних локусів. Ця система пропонується для утворення інформаційної бази генетичних ресурсів ячменю.
Публікації автора:
Бальвинская М.С., Сиволап Ю.М. Возможности использования многомаркерных дигаплоидных линий для картирования генома ячменя // Цитология и генетика. – 2000. – Т.34, № 6. – С. 42 - 48.
Бальвинская М.С., Сиволап Ю.М. RAPD-анализ множественно маркированных дигаплоидных линий для картирования генома ячменя // Физиол. и биохим. культурных растений. – 2001. – Т.33, № 5. – С. 409 - 413.
Сиволап Ю.М., Бальвинская М.С. Использование многомаркерных дигаплоидных линий для картирования генома ячменя при помощи полимеразной цепной реакции // Зб. мат. ІІ Міжнар. конф. "Використення сучасних молекулярно-генетичних і біотехнологічних розробок у генетико-селекційних дослідженнях". – Київ, 1998. – С. 53-54.
Бальвинская М.С., Сиволап Ю.М. SSR-анализ сортов ярового ячменя южно-украинской селекции // Сб. тез. Междунар. конф. молодых ученых "Современные проблемы генетики, биотехнологии и селекции растений". - Харьков, 2001. – С. 4-5.
Balvinskaya M.S., Sivolap Yu. M. Identification and certification of barley varieties by SSRP-analysis // Abstracts book of conf. for studens, PhD students and young scientists on molecular biology and genetics. – Kyiv, 2001. – P. 5.
Balvinskaya M.S., Sivolap Yu. M. PCR-analysis of multiple marked DH lines for barley genome mapping // Abstracts guide of the Internat. conf. "Plant, Animal and Microbe Genomes" . - San Diego (USA), 2002. – P. 144.
Balvinskaya M.S., Sivolap Yu. M. SSRP-analysis of spring barley varieties of the South-Ukranian breeding // Abstracts guide of the Internat. conf. "Plant, Animal and Microbe Genomes" . - San Diego (USA), 2002. – P. 123.
